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碎片衰竭后的妊娠和活生药后碎片低质量的胚泡转移(审查20例临床病例)

康斯坦丁·V Kirienko

奥尔特拉夫塔IVF诊所,4A纳贡纳,117186,莫斯科,俄罗斯

电子邮件 :bhuvaneswari.bibleraaj@uhsm.nhs.uk.

瓦伦蒂娜P Apryshko

奥尔特拉夫塔IVF诊所,4A纳贡纳,117186,莫斯科,俄罗斯

vladimir v Voloshanenko.

奥尔特拉夫塔IVF诊所,4A纳贡纳,117186,莫斯科,俄罗斯

Anna G Mironova.

奥尔特拉夫塔IVF诊所,4A纳贡纳,117186,莫斯科,俄罗斯

俄罗斯科学院伊曼纽尔生物化学物理研究所,科西吉纳st, 4,119334,俄罗斯莫斯科

谢尔盖A Yakovenko.

奥尔特拉夫塔IVF诊所,4A纳贡纳,117186,莫斯科,俄罗斯

罗蒙索夫莫斯科国立大学,物理学,生物物理署,1/2列宁基戈里,119991,莫斯科,俄罗斯

DOI: 10.15761 / COGRM.1000333

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数据与数据

抽象的

学习目的:在转移低质量的显微外切屑胚泡后评估IVF程序的临床结果。

材料和方法:该研究包括第5-6天的发育胚胎20胚胎,达到了胚泡阶段,其肾小管族被评估为“C”,由于存在15-35%的细胞质片段。胚泡接受了辅助孵化,然后进行了微操纵碎片整理。碎片整碎后,重新评估胚胎的质量并用于胚胎转移(ET)或冷冻保存,其次是在冷冻核心。在转移一个碎裂胚泡后,通过已知的临床结果分析了20例临床结果。

结果:碎片整理后2小时,所有20个胚泡的肾小管胚层均不得低于“B”类别。后续诊断出以下情况:没有怀孕 - 12例;早期妊娠 - 2例;持续的妊娠通过生命出生而解决 - 6例。

结论:低质量胚泡的碎片整容可以提高它们的形态学评估。使用碎裂胚泡的IVF程序的临床结果与良好质量的胚泡转移的临床结果相当,包括活产率。

关键词

胚胎的分裂,体外受精,胚胎成活力

介绍

评估IVF计划胚胎学阶段有效性的主要标准是适合转移的优质胚胎的存在和数量。胚泡的形态学评估是选择胚胎转移时最重要的标准,因为它在很大程度上反映了其活力[1,2]。

在胚胎的围卵腔的细胞质片段的存在被识别为在其可行性和低形态学评估[3]的降低的最常见原因。在一些情况下,当根据IVF程序的结果,患者不具有良好的质量的胚胎适合转印,尝试通过碎片整理[4-6],以增加胚胎的生存能力。

碎片整理是微观沉积细胞质片段的微观型碎片,胚囊中溅射的卵泡和细胞碎片的过程。这项工作的目的是通过显微外碎片整理程序评估低质量胚泡后IVF程序的临床结果。

材料和方法

学习规划

在2019年4月至12月的期间,显微外科碎片整理程序是在32次接受不孕症治疗的低质量的36个骨囊中进行的,在莫斯科艾尔特拉夫塔IVF诊所获得不孕症治疗。在该和随后的时间内,随后在冷冻核中转移,随后转移,以及对IVF程序的临床结果进行评估,进行胚胎转移(ET)或冷冻保存和储存的胚胎,以及评估妊娠的发病和分析。在2021年1月,可以获得和分析20例临床结果的数据(20例胚泡转移后)。获得胚胎的妇女的平均年龄为35.8岁(范围为25至46岁)。选择胚胎进行碎片整理时,不考虑不孕症,妇女年龄和施肥方法。使用供体卵母细胞以及具有PGD的程序中获得的胚胎未包括在研究中。在实验组中包含胚胎的标准如下:

- 在5-6th中没有良好的胚泡开发适合于ET或冷冻保存;

- 第5-6天的低质量胚泡的开发,其肾小管胚胎被评估为“C”(根据Gardner)[1]。

- 不包括在形成胚泡的滋养外胚层或ICM无核细胞质片段或卵裂球的体积为15%以上,但不超过胚胎体积的35%。

在等之后,评估以下标准:植入率,临床和持续的妊娠率,和活产率。

卵巢刺激和卵母细胞检索

在每日剂量的每日剂量为150-300IU的日剂量中,使用来自月经周期的2-3天的“短”协议通过抗胰管的“短”方案诱导超级化。通过在滤泡穿刺前34-36小时的剂量为10,000 IU的剂量施用HCG来引发排卵。由卵囊层围绕的卵母细胞围绕着卵泡在超声对照34-36小时后的卵泡穿刺,施用排卵剂量的HCG后。

施肥

对于所获得的卵母细胞受精,ICSI或IMSI程序使用,这取决于对精子参数。

胚胎发展的培养与评估

培养是在CO中进行的2- incubator在36.7°C的加湿气氛中,有6.0%的CO2。在矿物油层下单独地将胚胎培养在补充有5mg / ml蛋白(SPS,SAGE)的肉豆蔻培养基(乙腈)。在开发的第1,3,5和6天单独评估Zygotes和胚胎。根据Gardner [1]评估胚泡质量。

胚胎碎片整理

具有促肾小管的胚泡评估为“C”和碎裂体积超过15%,但不超过35%的胚胎体积,经历了显微外碎屑的碎片整理程序。

所有显微操作都在倒置的Leitz Fluovert FU显微镜使用霍夫曼调制对比系统(野生莱茨GmbH,德国)进行,并配有一组NARISHIGE显微(NARISHIGE,东京,日本)的。在第一阶段,用微量移液器控股(控股移液器,库克医疗)和透明带夹层微量移液器(ZPD,Origio)进行辅助孵化。从胞质片段的最大累积的侧面,透明带切成在¼周。切口,胞质片段,在那之后曾在发育和细胞碎片停止卵裂球利用显微器械进行辅助孵化的胚胎卵周隙去除。在罕见的情况下,当进行碎片整理,透明带夹层微量可能已经被替换为活检微量(活检移液器,TPC)更大的操作者​​方便。对于每个胚胎,整个碎片整理过程了3-5分钟。碎片整理后,胚泡培养2小时,然后形态重新评估并用于ET(第5天)或冷冻保存(5-6天),然后冷冻ET。

ET,评估怀孕的发病和结果

ET在滤泡刺穿(ISO循环中)或孕激素治疗开始后(在Cryo-et)开始后进行。将一个破碎的胚泡转移到患者的子宫腔中。每个转移的平均胚胎数为1.0(一个)。临床妊娠被子宫腔内的妊娠囊存在诊断,并在ET后4-5周的超声检查通过超声检查登记胎儿心跳。

持续妊娠率是由临床妊娠总数(12周或12周以上)与转移总数的比例决定的。在妊娠期结束时,对活产的数量进行评估。

结果

20临床病例与一个碎片整理囊胚在刺激周期(14个ETS)或冷冻循环(6低温ETS)转印后一个已知的临床结果的结果进行分析。显微碎片整理后两小时,所有20个胚泡的滋养外胚层物形态学评估不小于“B”类(图1)下。

图1。胚泡经历了显微外碎片整理程序(a。 - 操纵前; b。 - 碎片整理后立即; c。 - 操纵后2小时)。由于胚泡转移1,2和3,我们可以观察到分娩的持续临床妊娠;第4号 - 妊娠损失;第5,6号和第7号 - 没有怀孕。

在等之后,以下诊断出:

  • 12例没有怀孕,其中8例与ISO-CISCLES和4个带有冷冻ETE;
  • 临床怀孕8例,
  • 2例妊娠损失,其中1种ISO-CISCLES和CRYO-ET中的1;
  • 正在进行的怀孕通过分娩在6例中解决,其中5例用ISO-CISCLES和Cryo-et有1个。

因此,临床妊娠率为40%(8/20),活产解决的持续妊娠率为75%(6/8)。值得注意的是,在Altravita IVF Clinic 2019年的累计研究中,当移植质量良好的胚泡评分不低于“BB”(当移植1.1个胚胎/ET时)时,这些指标分别为34.2%和65.1%。2020年2月,一名健康的女性婴儿在妊娠37周时通过剖宫产分娩,这是由于低质量的碎片化胚泡移植而出生的第一名婴儿。

讨论

在体外受精(IVF)实践中,在胚泡期胚胎移植通常接受的标准[7]。在胚泡期胚胎移植的优点包括子宫内膜和胚胎,并选择具有较高的注入势[8]的胚胎能力之间更好的同步。Gardner和克拉夫特开发了基于三个参数胚泡评分系统:胚泡大小,内细胞团的质量和滋养外胚层质量[9]。

当在ISO循环中转移两种良好的胚泡(≥3AA)时,植入和临床妊娠率分别为69.9%和86.8%,而使用两个质量低于3AA的胚泡时,这些指标仅为28.1%和43.8%, 分别。换句话说,较差质量胚泡的植入比胚泡低2倍,质量≥3AA[1]。同一组研究人员在一个胚泡转移后获得了有利预后的患者的类似数据:胚胎植入和正在进行的妊娠率的比例为60.9%[2]。在回顾性研究,350个IVF循环中,巴拉巴和同事们还发现了在不同质量的胚泡转移后IVF程序结果的显着差异[10]。

灰色和同事修改了加德纳和专业的字母数字评估规模,以开发胚泡评分系统。根据其数据,在ISO循环中的胚胎转移期间,ICM和肾小管胚段的质量是评估怀孕发作的显着预后因素。随着“A”至“C”的质量下降,平均骨囊植入率从57%降至21%,并且在滴度胚胎质量下降的情况下,分别为58%至39%[11]。

一些研究已经表明,胚泡滋养外胚层的形态学评估使得它更容易预测IVF周期[12,13]妊娠。在回顾性研究,Honnma及其同事分析了每个囊胚形态学评估的三个组成部分来的IVF方案[14]的临床结果的贡献。结果发现,滋养外胚层的质量统计显著与正在进行的怀孕和流产率相关。当传送玻璃化/解冻的囊胚与滋养外胚层质量A的,B和C,进行性临床妊娠的比例分别为46.6%,34.1%和23.7%。相反,囊胚扩张既没有,也没有ICM的质量对的IVF方案[14]的临床结果在统计学上显著的效果。

之所以滋养外胚层质量和持续的怀孕和流产率差异有统计学显著关系目前尚不清楚。据了解,滋养外胚层细胞最终形成胎盘和ICM形式胎儿的细胞。出于这个原因,它相信,对于转让选择胚胎时,ICM形态预测妊娠结局不是滋养外胚层形态,由于认为胎儿细胞比胎盘细胞更加重要显著标准。然而,一些研究表明,滋养外胚层形态对妊娠比ICM的质量和程度胚泡膨胀[12-14]的的结果产生较大的影响。

一些研究表明,增加的胚胎片段化与植入减少有关[1,5,15]和妊娠率[15-17]。数据表明,去除片段改善了胚胎[18]的发育,并增加了植入率[5,15]。结果发现,由于胚胎转移的碎裂,艺术计划的临床结果类似[5]或者比来自对照组的胚胎转移更好[16]。

科学出版物的分析表明,致力于对临床结果进行碎片整理效应的研究主要在裂解阶段[4]胚胎[4],特别是在第2次[18,16]和第3天的胚胎上进行[5,15]。

我们设法找到了唯一一项以处于囊胚期的人类胚胎[19]为碎片碎片对象的研究。在这项工作中,综述了三个临床病例的转移整理囊胚到体外受精项目的患者与三个临床妊娠。在我们的研究中,我们报道了6个孩子的出生,是由显微外科手术粉碎后的20个低质量胚泡移植而获得的。据我们所知,这是第一个报道使用低质量碎片化胚泡移植的活产的研究。

据认为,细胞质碎裂是细胞程序性死亡的结果,释放有毒物质破坏周围细胞或阻止附近裂球的分裂[15,18]。此外,碎片还会干扰细胞间的通讯,扰乱卵裂球的空间方向,或限制胚胎进行分裂或压实所需的空间。研究表明,碎片会导致附近细胞的继发性变性。透射电镜观察发现,胞质碎片附近的卵裂球出现空泡化的迹象[20,21]。当这些片段被移除后,胚胎中卵裂球相应的空间组织被恢复,从而更充分地形成细胞间连接[15,22]。同时,碎片抽吸可以消除凋亡细胞碎片[16]的毒性作用,改善胚泡微环境。

这个问题和上述研究的主要缺点是它们的非随机性。仍有待确定碎片整理程序的哪些组分对于改善IVF计划的临床结果是决定性的:直接碎片整理或以前的操纵Zona pellucida,即Assissted孵化。尽管有助于孵化或完全去除Zona pellucida在优质的胚泡中,不会导致IVF程序的有效性增加[23],在胚胎具有低形态评估的胚胎中可以具有一定的积极效果。因此,需要进一步的比较前瞻性研究来评估胚胎碎片整理的作用,以提高正在进行的IVF不孕症治疗的患者的持续妊娠率。

结论

低质量胚泡的碎片爆炸性可以提高它们的形态学评估。使用碎裂胚泡的IVF程序的临床结果与良好质量的胚泡转移的临床结果相当,包括活产率。

作者的贡献

概念和设计,Kirienko K.v.

材料的收集和加工-Kirienko K.v.,Apryshko V.P.,Voloshanenko V.V.,Mironova A.G.

文字写作-而Kirienko

编辑 -S.A. Yakovenko.

宣言

作者报告没有财务或商业利益冲突。

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编辑信息

主编辑

约翰·利文斯顿鲍威尔
北卡罗来纳大学医学院
美国

文章类型

研究文章

出版的历史

收到日期:2021年4月16日
接受日期:2021年8月3日
出版日期:2021年8月9日

版权

©2021 KIRIENKO KV。这是在创意公约归因许可的条款下分发的开放式文章,其允许在任何媒体中不受限制地使用,分发和再现,只要原始作者和来源被记入。

引文

Kirienko KV, Apryshko VP, Voloshanenko VV, Mironova AG, Yakovenko SA (2021)临床妇产科报告7:DOI: 10.15761/COGRM.1000333

通讯作者

康斯坦丁·V Kirienko

奥尔特拉夫塔IVF诊所,4A纳贡纳,117186,莫斯科,俄罗斯

电子邮件 :bhuvaneswari.bibleraaj@uhsm.nhs.uk.

图1。胚泡经历了显微外碎片整理程序(a。 - 操纵前; b。 - 碎片整理后立即; c。 - 操纵后2小时)。由于胚泡转移1,2和3,我们可以观察到分娩的持续临床妊娠;第4号 - 妊娠损失;第5,6号和第7号 - 没有怀孕。